Um é semelhante ao papel de teste de ouro coloidal comumente usado em testes de vírus da gripe.
O papel de teste de ouro coloidal, na verdade, consiste em usar uma forma coloidal de ouro para marcar biomacromoléculas e fixá-lo no papel de teste de PVC, deixar um orifício de amostra, definir uma linha de detecção e uma linha de controle de qualidade, para que a amostra seja adicionada ao orifício de amostra. Em seguida, adicione algumas gotas de meio líquido e deixe o líquido fluir para a almofada absorvente na outra extremidade do papel de teste. A cromatografia é realizada no papel de teste, geralmente por 10 a 15 minutos. Após a reação imunológica no papel de teste, é possível observar a agregação de ouro coloidal. Existe uma faixa vermelha na posição visível a olho nu, para que você saiba o resultado do teste.
Atualmente, existem dois tipos de tiras de teste de ouro coloidal que foram divulgadas e relatadas para o novo coronavírus. Uma delas é para detectar o antígeno do novo coronavírus.
Este método utiliza o método sanduíche de anticorpo duplo, ou seja, para o mesmo antígeno, há dois anticorpos na folha de teste, mas em posições diferentes. O anticorpo marcado com ouro coloidal é um dos anticorpos contra o antígeno, na almofada de ligação da folha de teste.
Por exemplo, amostras de swabs de garganta, swabs nasais e amostras de fluido de lavagem alveolar são pingadas no orifício da amostra e, em seguida, algumas gotas de meio fluido são pingadas. Se houver um antígeno viral específico na amostra clínica, ele será ligado ao ouro na almofada. Reconhecido pelo anticorpo alvo, um complexo antígeno-anticorpo é formado. Neste momento, continue a fluir na direção da almofada absorvente. Na linha de detecção, há outro anticorpo contra o antígeno. O epítopo reconhecido por este anticorpo é diferente do anticorpo marcado com ouro, portanto, o mesmo antígeno pode ser afetado simultaneamente por esses dois anticorpos. Identificado. Neste momento, uma parte do anticorpo marcado com ouro será capturada na linha de detecção, de modo que a cor é revelada na linha de detecção.
É claro que a quantidade de anticorpo marcado com ouro é definitivamente excedente, de modo que não apenas será interceptada na linha de detecção, mas continuará a fluir na direção da almofada absorvente. Nesse momento, existe uma linha de controle de qualidade. Na linha, existem anticorpos direcionados especificamente contra anticorpos marcados com ouro (ou seja, anti-anticorpo, que é essencialmente um anticorpo, mas o objeto antígeno que ele reconhece também é um anticorpo). Como a linha de controle de qualidade tem uma capacidade muito forte de reconhecer anticorpos marcados com ouro, essa linha definitivamente mostrará cor. Este também é o princípio do controle de qualidade. Se essa linha não mostrar cor, o resultado do teste é inválido.
Portanto, o julgamento de negativo e positivo é muito simples, ambas as linhas são coloridas como positivas; somente a linha de controle de qualidade é colorida como negativa; exceto esses dois casos, os experimentos são inválidos.
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Teste de antígeno de ouro coloidal para covid
pode ser usado para triagem precoce de infecções e é um suplemento eficaz para detecção de ácido nucleico (PCR).
O método acima é o método sanduíche de anticorpo duplo para detectar antígenos, e o outro método é para detectar anticorpos IgM específicos para o novo coronavírus no sangue do paciente. Este é o papel de teste de ouro coloidal para o método de captura de IgM.
Em primeiro lugar, devemos entender a lei da resposta de anticorpos humanos——
Quando o corpo humano é exposto a antígenos estranhos, o primeiro anticorpo produzido é a IgM (Ig significa imunoglobulina/imunoglobulina), mas também precisa ocorrer cerca de uma semana após a exposição do corpo à estimulação do patógeno, portanto, em termos de janela de tempo de detecção, não é tão eficaz quanto o ácido nucleico. O teste é rápido.
A IgM é, na verdade, a forma de secreção do receptor de células B (BCR) na superfície dos linfócitos B. Trata-se de uma patrulha preparada com antecedência durante o desenvolvimento e a maturidade do corpo humano, mas equivale a um recruta, que ainda não viu o inimigo. Após a IgM reconhecer o antígeno, as células B que as produzem entram no linfonodo, onde são treinadas com a ajuda das células apresentadoras de antígenos (APC) (principalmente células dendríticas dendríticas) e dos linfócitos T auxiliares, que foram analisados quanto à hostilidade. O salto qualitativo do inimigo é que as próprias células B se iluminaram e evoluíram, o que equivale a um lutador de nível 1 em Civilization se tornar um lutador de nível 6. O resultado da evolução é a diferenciação das células B em plasmócitos, que podem ser secretados em grandes quantidades. Anticorpos, e a afinidade desses anticorpos é muito maior do que a da IgM. Isso é IgG. A IgG existirá no corpo por um longo tempo, e algumas podem até existir por décadas. No entanto, a IgM só aparece quando o patógeno chega pela primeira vez e dura cerca de uma semana. Portanto, a IgM pode ser usada para indicar se o corpo está em um estado de infecção aguda.
Depois de entender as regras de resposta de anticorpos do corpo, sabemos que se os anticorpos IgM contra o novo coronavírus puderem ser detectados no sangue humano, o diagnóstico clínico poderá ser feito.
O princípio do papel de teste de ouro coloidal do método de captura de IgM é bem compreendido.
O layout da folha de teste ainda é o mesmo, mas tudo é diferente em cada lugar——
A almofada de amostra é gotejada com amostras de sangue (soro), que podem conter anticorpos IgM contra o novo coronavírus, e o antígeno marcado com ouro reservado na almofada de ligação, em vez do anticorpo marcado com ouro. Este antígeno é uma proteína do novo coronavírus (expressa de forma recombinante in vitro). Desta forma, a IgM se ligará a este antígeno e carregará o ouro coloidal. A posição da linha de detecção é o anticorpo contra IgM humana, de modo que se houver IgM na amostra de sangue, uma parte dela será capturada pelo anticorpo neste local, mas se estas IgM não puderem reconhecer o antígeno do coronavírus marcado com ouro na almofada de ligação, então o teste O fio não desenvolverá cor. Então este é o princípio da linha de detecção.
Para a linha de controle de qualidade, aqui está o anticorpo preparado em laboratório contra o antígeno marcado com ouro na almofada de ligação. Portanto, independentemente de haver IgM específica na amostra, desde que o meio de fluxo seja adicionado, o antígeno marcado com ouro na almofada de ligação será capturado por este local, ou seja, a linha de controle de qualidade será definitivamente colorida. Então, este controle de qualidade é tão simples quanto o acima, cerca de 15 minutos, e pode ser avaliado com base na reprodução de cores das duas linhas.
Após a introdução do princípio, a maior vantagem do ouro coloidal é que ele é rápido e conveniente.
Mas as deficiências também são óbvias: o rendimento não é alto e a precisão do papel de teste depende muito da especificidade do anticorpo. Se a qualidade do anticorpo não for boa, é fácil ocorrer reação cruzada e causar erros de julgamento. Além disso, o tempo de produção de IgM é posterior ao tempo de replicação do vírus, portanto, a janela de detecção não é tão boa quanto a detecção de ácido nucleico.
